細(xì)胞器的分離方法
2009-05-18
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實(shí)驗(yàn)室一般采用差速離心或密度梯度離心的方法得到分離細(xì)胞器。
1.細(xì)胞膜的分離
細(xì)胞膜又稱質(zhì)膜,分離細(xì)胞膜有助于研究生物膜的結(jié)構(gòu)與功能。一般說,紅細(xì)胞膜與線粒體膜的制備用差速離心法即可,其他細(xì)胞膜的分離可根據(jù)膜組分的密度大小不同,采用梯度離心后,分布于區(qū)域,可分離得到純制品。
2.線粒體的分離
線粒體普遍存在于真核細(xì)胞中,它是細(xì)胞呼吸的主要場所,細(xì)胞活動(dòng)所需能量主要依靠在線粒體內(nèi)進(jìn)行氧化所產(chǎn)生的能,線粒體的分離主要靠差速分離。
3.線粒體膜分離
線粒體膜分離方法主要是密度梯度離心。
4.聚核糖體的分離
核糖體是由核糖酸和蛋白質(zhì)組成的核糖核酸蛋白顆粒,附著在粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的稱固著核糖體,分散在細(xì)胞內(nèi)的稱游離核糖體,數(shù)個(gè)或數(shù)十個(gè)核蛋白體聚在一起稱為聚核糖體,一般用差速離心法可分離出聚核糖體。
5.微粒體分離
微粒體是一種脂蛋白所包圍的囊泡,含核糖核酸,蛋白質(zhì)和脂類,分離微粒體的方法是利用分級(jí)離心法,去掉細(xì)胞核和線粒體后,經(jīng)超速離心而制備。
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